シングルセル分注機「On-chip SPiS」
近年、1細胞解析技術が注⽬されています。
例えば、がん研究では多種類のクローンが含まれていることから、
がん細胞を1個ずつ解析し各細胞のサブタイプや遺伝⼦変異を⾒分ける必要性が⾼まっています。
しかし、現在普及しているシングルセル解析装置は、操作性や技術的な⾯において満⾜できる精度に⾄っていません。
限界希釈法は簡便かつ低コストな⼿法ですが1細胞分注の精度は約21%であり、
リクローニング操作を繰り返しおこなう必要も⽣じます。
オンチップ・バイオテクノロジーズはこの問題を解決するため、On-chip® SPiSを開発しました。
本装置を⽤いることで簡単操作・短時間で、90%を超える1細胞分注精度を実現しました。
On-chip® SPiS(オンチップ・スパイス)の特徴
1. 簡単・自動操作
2. 使い捨てピペットチップ分注方式
3. 自動希釈機能+CCDカメラの画像認識
4. サンプルサイズは200 μmまで分注可能
5. 手頃価格
On-chip® SPiSの1細胞分注の精度と解析速度
A549細胞株を1細胞/1 wellで分注した。
その結果、96 wellを54分で分注することができた。また、1細胞分注されたwellは90であり、そのうち83 wellで増殖が確認された。
On-chip® SPiSによる個数指定分注の確認(ATPアッセイ)
ノックアウト株の1細胞分注
On-chip® SPiSはゲノム編集後のスクリーニングにも有用である。
CRISPR-Cas9によりポリオウイルス(PV)受容体のノックアウト細胞株を作製した。1細胞ずつウェルプレートに分注し、培養後にウイルス感染を行った。その結果、PV耐性を獲得した49種のクローンの樹⽴に成功した。
HDR変異クローンのセレクション
トランスフェクションしたHEK293T細胞をOn-chip® Sort(当社開発のセルソーター)により陽性株を分取し、On-chip® SPiSで1細胞分注を実施した。
その結果、ゲノム編集されたクローンを効率的にシングルセルで得ることができた。また、一度の実験でホモ変異をもつクローンを得る効率の高さも実証された。
分注した細胞数:384
得られたクローン数:120
ゲノム編集が生じたクローン数:41
目的変異HDRをもつクローン数(ホモでもつクローン数):1
サイズを揃えたスフェロイド塊の分注と薬剤評価試験
⽣体環境を再現できるスフェロイド(細胞塊)の利⽤は、抗癌剤などの薬剤評価において注⽬されているが、⾼精度な評価にはスフェロイドのサイズの均一化が必要である。
そこでOn-chip® SortおよびOn-chip® SPiSを利⽤することで、⼀定サイズのスフェロイドを回収、そして単⼀スフェロイドを簡便・迅速に分注することでより精度の⾼い薬剤アッセイが可能となる。
細菌を培養したゲルマイクロドロップ(GMD) の分注
On-chip® SPiSは細胞に限らず、GMD (ゲルで固まった微小液滴) も分注することが可能である。1細胞から増殖した細菌はGMD内部にてマイクロコロニーを形成することで、CCDカメラによる認識を可能とする。
遊泳するテトラヒメナの分注と培養
原⽣動物のテトラヒメナを合計180 wellに1細胞/wellで分注し、3⽇間培養した。その結果、159 wellで1細胞分注され、そのうち137 wellで増殖した。このことから、遊泳運動する細胞も⾼精度に分注できることが確認された。
製品名 | On-chip® SPiS |
製品番号 | 70001 |
装置構成 | 本体、制御PC (Windows) |
本体サイズ | 610 x 365 x 450 / W x D x H (mm) |
分注方式 | 使い捨てピペットチップ |
認識方法 | 解像度5メガピクセルCMOセンサー内蔵カメラによる画像認識 |
チップ内液量 | 0.2μL |
サンプル | 細胞、花粉、原生生物、細胞集塊、人口粒子(ビーズ)、ゲルマイクロドロップなど |
認識サイズ | 10 – 200 μm (培養細胞株で確認) |
分注精度 | 90%以上(サンプル状態に依存) |
バイオセーフティ | 安全キャビネット内に設置可能 |
ダメージ | 細胞等へのダメージは低い |
撹拌方法 | 使い捨てピペットチップによる自動撹拌 |
溶液 | 水 培養液 海水など |
処理速度 | 60分/ 96 well (参考時間 : 設定条件とサンプルの状態による) |
対応プレート | 96wellプレート、384wellプレート |
電源⼊⼒ | AC 100-120V, 50/60Hz |
消費電⼒ | 1.0A typ (ACIN 100V) |
On-chip® SPiS専用分注ピペットチップ(滅菌済)
使用方法:分注用ピペットチップとして使用します。
滅菌済のため無菌的な分注操作が可能です。
品番 : 1007001
品名 : Chip-384S