Introduction
近年、CRISPR-Cas9などを利用したゲノム編集技術が目覚ましく進歩し、医療・創薬といった様々な分野で利用されています。基礎研究においても遺伝子の影響やその機能解明をするため、培養細胞に遺伝子編集を行い目的細胞株を樹立し研究に役立てられています。一般的には、標的遺伝子と薬剤耐性遺伝子を一緒に導入し、薬剤でセレクションを行い細胞株を樹立する方法を用いますが、薬剤濃度の最適化や、細胞のクローニング工程が非常に煩雑になります。また培養細胞によっては遺伝子導入効率が低く目的の編集クローンが得られない場合も多くあります。今回紹介する技術は、ポリオウイルス受容体（PVR）ノックアウト遺伝子と蛍光タンパク質を同時に導入した系になります。その蛍光量を指標としてOn-chip® Sortで候補となる細胞をセレクションし、その細胞をOn-chip® SPiSを用いて1細胞１ウェルになるようにプレート分注しました。これによりPVR KO細胞を得ることができました。この一連のOn-chip®システムを利用した ”高効率な遺伝子編集細胞株樹立方法” の事例を紹介します。
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